密封完整性測試（CCIT）-從法規(guī)到生產(chǎn)(中)

更新時間：2021-11-24 點擊次數(shù)：1273次

化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量與療效一致性評價技術(shù)要求（征求意見稿）中，穩(wěn)定性研究技術(shù)要求中提到：“穩(wěn)定性考察初期和末期進行無菌檢查，其它時間點可采用容器密封性替代。容器密封性可采用物理完整性方法（例如壓力/真空衰減等）進行檢測，并進行方法學(xué)驗證。"

在產(chǎn)品生命周期中不同階段對CCIT的要求。實際生產(chǎn)和操作過程中如何滿足這些要求呢？目前市場上有哪些方法可供選擇？不同的產(chǎn)品如何選擇合適的檢測方法呢？本篇將圍繞這些內(nèi)容展開進一步的討論。

1、常見的容器密封完整性驗證方法主要有如下幾種

1.1 微生物侵入實驗法驗證密封完整性：

往產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)基并按常規(guī)方式壓塞，軋蓋，滅菌后冷卻備用。將冷卻后的容器倒置并將瓶口*浸沒于高濃度的運動菌液中，如大腸埃希菌，銅綠假單胞菌或粘質(zhì)沙雷菌，4小時后，將容器外表面消毒并培養(yǎng)，看是否有挑戰(zhàn)性細菌在容器內(nèi)生長。

1.2 飽和鹽水法測試密封性：

有些產(chǎn)品可以做鹽水滲入試驗：在玻璃瓶灌入注射用水，并按常規(guī)方法密封（壓塞、軋蓋），此后，將其倒置于一盛有飽和鹽水的托盤內(nèi)，是膠塞及鋁蓋全部進入飽和鹽水中。將其放入滅菌設(shè)備并按常規(guī)的滅菌程序滅菌，分析瓶中內(nèi)容物是否含氯化鈉檢查密封完整性。

1.3 亞甲基藍溶液法：

取適當數(shù)量的玻璃瓶，在玻璃瓶中灌入注射用水，按常規(guī)方法壓塞、軋蓋。膠塞及樣品的處理最好模擬實際生產(chǎn)工藝。將樣品倒置，放入裝有一定濃度亞甲基藍溶液的容器中，使其*浸沒。將容器放入真空箱中抽真空，維持一段時間，真空箱恢復(fù)至常壓，繼續(xù)維持一段時間。取出，用水沖洗瓶外，目檢。亞甲基藍溶液不得滲入瓶內(nèi)。

開發(fā)階段的容器密封完整驗證方法有時也用于生產(chǎn)過程中的檢測。

2、常見的密封完整性檢查方法主要有如下幾種

2.1 利用染色浴測試密封性：

在高溫滅菌箱滅菌之后，染色浴的測試可以在滅菌腔室內(nèi)進行（如果技術(shù)條件允許的話），也可在另一個可以調(diào)整壓力的容器中進行。將容器*浸沒在染色浴，并且存在負壓的環(huán)境中。如果該容器有裂縫，空氣就會從瓶中溢出，當容器表面有正壓時，染色溶液會從裂縫進入瓶內(nèi)部。通過目檢剔除變色的容器。

對于小批量產(chǎn)品，染色浴是一個相對經(jīng)濟的做法，不需要很多技術(shù)儀器，而且可以檢出較大的泄漏。然而，該方法具有如下缺點：

●必需對染色浴的溶液（染色物）進行控制，維護，并在使用后，以適當?shù)姆绞脚欧牛苑檄h(huán)保的要求。此外，應(yīng)確定清潔步驟，以便可靠的清除染色物的殘留；

●如果是棕色玻璃，那么此方法的靈敏度較差，結(jié)果較難確認；

●如果該測試是在另一個可調(diào)壓力的容器中進行，過程比較復(fù)雜，包括抽真空、加壓（每次需要30分鐘）以及產(chǎn)品轉(zhuǎn)移、測試等步驟；

●染料被稀釋或隨著時間褪色；

●存在微生物污染風(fēng)險，在容器上的裂痕須較大，才能在目檢中檢出，微小而不易檢出的染色溶液滲漏，可導(dǎo)致微生物或化學(xué)污染。（詳見圖片1示例）。

圖1，染色浴法檢測后不同程度的泄漏樣品

2.2 蒸汽中的密封完整性測試：

灌裝有油性溶液的容器在高壓滅菌箱中抽真空以及連續(xù)的壓力變化后，蒸汽可以滲透入容器中，這樣可以在油相中發(fā)現(xiàn)可見的渾濁，或者在出現(xiàn)較大的裂痕時，在容器的底部會出現(xiàn)可見的油水兩相分界。這種情況都可以通過目檢或者電氣檢查法檢測到。

考慮到以上檢測方法的缺點，監(jiān)管和法規(guī)更推薦使用無損的物理檢測方法。

3、常見的幾種無損的物理檢測方法

3.1 高壓放電法(HVLD)：

檢測原理：利用高壓放電原理，在待檢藥品兩端分別連接兩個電極，C1和C2為藥液和電極之間的電容（因為絕緣瓶壁的阻擋，電極不能與溶液接觸，所以產(chǎn)生電容），R為藥液的電阻值。當容器不泄漏時，回路中會產(chǎn)生較低的微電流為I1；當容器泄漏時，由于泄漏引起的藥液與電極之間的電容消失，即容抗消失，回路中會產(chǎn)生的較高的電流I2，通過電流值的比對，可以判斷出容器是否泄漏。

圖2，高壓放電法檢測原理圖

該方法主要用于在絕緣包裝里面的不易燃導(dǎo)電液體的檢測，在選擇方案時應(yīng)首先評價該檢測方法和產(chǎn)品的兼容性。其次，儀器的設(shè)計/制造會影響檢測結(jié)果，需評價設(shè)備的檢測工藝能否滿足檢測需求。如，包裝需要被旋轉(zhuǎn)以捕捉頂空區(qū)域的泄漏等。

不能用該方法檢測的產(chǎn)品有：

●電導(dǎo)率低于1.5μS/cm；

●油類產(chǎn)品；

●裝量太低的產(chǎn)品；

●可燃，易燃產(chǎn)品，含有酒精等有機溶劑的產(chǎn)品；

●凝膠類產(chǎn)品（流動性差，難以使藥水滲入裂紋）；

●對氧氣敏感的產(chǎn)品（高壓放電產(chǎn)生臭氧，需考慮臭氧的氧化性）。

3.2 真空/壓力衰減法(PDLD)：

檢測原理：將待檢測產(chǎn)品置入密封容器中，向密封容器充入定流量、定壓力的正壓或負壓（相對于大氣壓力）氣體，然后保壓至平衡狀態(tài)，如果瓶子泄漏，密封容器和瓶子間的空間壓力變化，通過高精度壓力傳感器即可以區(qū)分出泄漏瓶與合格瓶。根據(jù)不同的應(yīng)用場合又主要分為以下幾種：壓力衰減法，真空衰減法和差壓法等。